amplification of intermethylated sites（AIMS）　甲基化间区位点扩增

甲基化间区位点扩增是一种检测甲基化的高通量分析方法，采用甲基化敏感和甲基化不敏感的同裂酶酶切以及接头引物扩增甲基化间区序列。通过改变接头引物的序列控制扩增带的复杂程度，所得片段在200～2000bp，与人类基因组中CpG岛的分布频率基本相似。主要步骤如下：将基因组DNA用SmaⅠ进行酶切，该酶识别非甲基化的CCCGGG位点，而保留甲基化的CCCGGG位点。酶切后产生平末端，然后再将上述酶切产物用XmaⅠ进行酶切，该酶可识别甲基化的CCCGGG位点，酶切后产生黏性末端。将酶切产物与接头进行连接，用与接头配对的引物进行PCR扩增，只有两端带接头的甲基化的片段才能被扩增。最后将差异的甲基化片段进行克隆测序分析。